【】LB培养基:从构成到应用,一文全
你是否对那个在微生物学及分子生物学实验中频繁出现的LB培养基感到好奇呢?今天,就让我们一起走进LB培养基的世界,深入了解其历史背景、构成、制备、应用及其特点。
一、名称来源
LB培养基,全称为Luria-Bertani培养基,这一名称源自其两位创造者——微生物学家萨尔瓦多·卢里亚(Salvador Luria)和朱塞佩·贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)。在20世纪50年代,他们为微生物的培养和繁殖提供了一种全新的营养丰富的培养基。
二、主要构成
1. 胰蛋白胨:提供氮源、氨基酸和小肽,支持细菌生长。
2. 酵母提取物:提供维生素、核苷酸和微量元素,为细菌提供全面的营养。
3. 氯化钠:维持渗透压,促进细菌正常代谢。
4. 琼脂粉:用于固体培养基的固化。
三、制备步骤
制备LB培养基其实并不复杂:将上述成分溶解于蒸馏水中,搅拌至完全溶解后,调节pH至7.0-7.2,然后进行高温高压灭菌,冷却后即可使用。若需制作固体培养基,则在灭菌前加入琼脂粉。
四、主要应用
1. 常规细菌培养:LB培养基能快速扩增大肠杆菌等菌株。
2. 质粒提取:用于培养携带质粒的细菌。
3. 蛋白表达:LB培养基是诱导重组蛋白生产的理想选择。
4. 克隆筛选:结合抗生素,筛选转化成功的菌落。
五、特点
1. 营养丰富:适合大多数细菌的快速生长,繁殖速度大约每20分钟一代。
2. 通用性强:操作简单,不需要复杂的设备和工艺,成本低廉。
3. 适用性广:无论是需氧菌还是兼性厌氧菌,都能在LB培养基上生长。
六、常见变种
除了基本的LB培养基,还有如LB-Miller培养基、LB-Lennox培养基(低盐LB)和SOC培养基等变种,分别适用于不同的实验需求。
七、注意事项
使用LB培养基时,若用于抗生素筛选,需在灭菌后冷却至约50℃时加入抗生素,避免高温导致抗生素失活。长期存放的LB培养基可能会导致水分蒸发,固体培养基表面出现裂纹。
LB培养基因其高效性和简便性,已成为实验室中细菌培养的基础工具,尤其在分子生物学和微生物学实验中扮演着不可或缺的角色。无论是初学者还是专业人士,都能从中受益。